研究者們對(duì)潔凈工作臺(tái)無(wú)菌操作空間環(huán)境的要求越來(lái)越高,采用單純的紫外殺菌時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng).借助無(wú)毒無(wú)害的化學(xué)殺菌劑輔助紫外殺菌將會(huì)有效地縮短殺菌時(shí)間,潔凈工作臺(tái)的利用更高效
,同時(shí)也可延長(zhǎng)紫外燈的使用壽命
.1.1 原料實(shí)驗(yàn)室自制果汁,并在室溫下開(kāi)蓋放置
36 h ,果汁與空氣直接接觸,使果汁在自然環(huán)境條件下污染一定濃度的雜菌
.1.2 培養(yǎng)基普通營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:胰蛋白胨 5 g,酵母浸粉 2.5 g ,葡萄糖
1.0 g,瓊脂粉 15.0 g ,
pH 值 7.0 ,去離子水
1 000 mL,121 ℃滅菌 30 min.1.3 主要儀器與設(shè)備YXQ-LS-70A 型高壓滅菌鍋(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠) ;
BGZ-240 型烘干箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠) ;
SW-CJ-2D 型潔凈工作臺(tái)(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);SPX-150B-Z型生化培養(yǎng)箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠).1.4 含菌培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備本文采用直徑為 9 cm 的培養(yǎng)皿(表面積為 3.14×4.52=63.585 cm2) ,按照平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定自制果汁中細(xì)菌污染情況
,重復(fù)
3 次,取平均值.然后吸取自制飲料 1.0 mL 均勻涂布至普通培養(yǎng)基上,涂布后的含菌培養(yǎng)基上細(xì)菌分布密度可由公式(1)計(jì)算得到.含培養(yǎng)基上細(xì)菌分布密度(CFU?cm-2) = 自制果汁中細(xì)菌總數(shù)(CFU?mL-1)培養(yǎng)皿表面積(cm2) 1.5 潔凈工作臺(tái)乙醇輔助紫外殺菌效果的確定將 21 個(gè)含菌培養(yǎng)基分為 7 組,分別置于潔凈工作臺(tái)(操作空間為 1150×500×500 mm)中,將培養(yǎng)皿蓋打開(kāi),然后開(kāi)啟紫外燈(40 W)照射 30 min,每隔 5 min 取出 1 組培養(yǎng)皿.潔凈工作臺(tái)中均勻噴入 10 mL 75%乙醇溶液,然后按照上述方法將開(kāi)蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作臺(tái)中紫外燈照射 30 min,未經(jīng)紫外線(xiàn)照射的作為陰性對(duì)照,取出的培養(yǎng)皿于 37 ℃條件下培養(yǎng) 24 h,進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù),取 3 次重復(fù)的平均值.1.6 潔凈工作臺(tái)無(wú)菌環(huán)境維持時(shí)間的確定將開(kāi)蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作臺(tái)中,采用乙醇輔助紫外線(xiàn)照射 25 min,然后將紫外燈關(guān)閉,培養(yǎng)皿繼續(xù)置于潔凈工作臺(tái)中 48 h,每隔 12 h 取出 1 組培養(yǎng)皿,置于 37 ℃下培養(yǎng) 24 h,進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),每組 3個(gè)重復(fù),取平均值.
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